Реаксияи занҷири полимераз, мухтасар ҳамчунPCRдар забони англисӣ, як усули биологияи молекулавӣ аст, ки барои тақвият додани пораҳои мушаххаси ДНК истифода мешавад.Онро метавон ҳамчун як репликатсияи махсуси ДНК берун аз бадан баррасӣ кард, ки метавонад миқдори хеле ками ДНК-ро зиёд кунад.Дар давоми тамомиPCRДар ҷараёни реаксия як синфи моддаҳо – ферментҳо нақши муҳим мебозанд.
1. Так ДНК
Дар тачрибахо дар рузхои аввалиPCR, олимон аз Escherichia coli DNA polymerase I истифода бурданд, Аммо дар ин фермент мушкилот вуҷуд дорад: вай бояд ҳар дафъае, ки цикл анҷом дода мешавад, ферменти навро пур кунад, ки ин қадамҳои амалиётро каме мушкил мекунад ва пурра ба таври автоматӣ пур кардани он душвор аст.Ин мушкилот пас аз он ҳал карда шуд, ки олимон тасодуфан полимеразаи Так ДНК-ро аз Thermus aquaticus дар соли 1988 ҷудо карданд. Аз он вақт инҷониб амплификацияи автоматии ДНК ба воқеият табдил ёфт.Кашфи ин фермент низ месозадPCRтехнология технологияи қулай, амалӣ ва универсалӣ.Дар айни замон, полимерази Taq DNA полимерази маъмултарин дар маҷмӯаҳои ДНК мебошад.
2. PfuDNA
Тавре ки дар боло зикр гардид, Taq DNase як иштибоҳи калон дорад, аз ин рӯ, олимон полимеразаи Taq DNA-ро то андозае тағир доданд, то амплификацияи ғайримуқаррариро аз сабаби номувофиқӣ пешгирӣ кунад, ки дар натиҷа натиҷаҳои санҷиш нодуруст аст.Аммо тағир додани полимеразаи Taq DNA метавонад фаъолияти полимеразаи ДНК-ро дар ҳарорати хонагӣ боздорад.Полимеразаи PfuDNA метавонад камбудиҳои дар боло зикршудаи полимеразаи Taq DNA-ро ҷуброн кунад, то реаксияи PCR ба таври муқаррарӣ анҷом дода шавад ва сатҳи муваффақияти амплификацияи генҳои мавриди ҳадаф ба таври муассир беҳтар карда шавад.
3. Транскриптазаи баръакс
Транскриптазаи баръакс дар соли 1970 кашф карда шуд. Ин фермент РНК-ро ҳамчун қолаб, dNTP-ро ҳамчун субстрат истифода мебарад, принсипи ҷуфткунии пойҳоро риоя мекунад ва як қатори ягонаи ДНК-ро ба қолаби РНК дар самти 5′-3′ илова мекунад.Транскриптазаи баръакс пеш аз ҳама ба фаъолияти ДНК полимераз аз қолибҳои ДНК ё РНК вобаста аст ва аз ин рӯ фаъолияти 3′-5′ экзонуклеаза надорад.Аммо, он дорои фаъолияти RNase H мебошад, ки дарозии синтези транскриптазаи баръаксро ба андозаи муайян маҳдуд мекунад.Аз сабаби паст будани эътимоднокӣ ва термоспазирии транскриптазаи баръакси ваҳшӣ, олимон инчунин онро тағир доданд.
БароиPCRтаҷрибаҳо, масолеҳи асосӣ инҳоянд: найчаи инфиродии ПТР, найчаи 4/8-рахи ПЗР, плитаҳои ПТР.
ЛабиоМаводи масрафи PCRзерин дорандафзалиятхо:
Пластинаҳои PCR: Мутобиқати васеи сикли гармидиҳӣ;Контрасти баланд, муайянкунии осони чоҳ;инъикоси хуби флуоресцентӣ; хубинтиқоли гармӣ;Сертификатсияшудаи DNase, RNase, DNA, ингибиторҳои PCR ва бидуни пироген озмудашуда.
Қубурҳои инфиродии PCR: ба бухоршавӣ тобовар; хубинтиқоли гармӣ;равшании аълои оптикӣ; DNase, RNase, DNA, ингибиторҳои ПТР сертификатсияшуда ва бидуни пироген озмудашуда.
4/8-рахҳои найҳои PCR: Деворҳои ултра борик; равшании баланд; инъикоси хуби флуоресцентӣ;метавонад дар саноати фармасевтӣ, саноати хӯрокворӣ ва биологияи молекулавӣ истифода барад; маводи баландсифат, бокираи PP; DNase, RNase, DNA, ингибиторҳои ПТР сертификатсияшуда ва бидуни пироген озмудашуда.
Вақти фиристодан: июн-09-2023